プレMAFの技術情報
- プレMAFに関する実験
- ヒトPBMC付着細胞分画の貪食能評価（東京慈恵会医科大学との共同研究結果）
ヒトPBMC付着細胞分画の貪食能評価
（東京慈恵会医科大学との共同研究結果）
試験方法
健常成人ボランティアよりヘパリン採血で末梢血を約20ml採取した。Ficoll density gradient centrifugation法を用いてPBMCを採取し、無血清RPMI-1640培地に細胞を浮遊させ10cm Petri Dishに植え込んだ。プレMAF（PBMCの由来した同一健常ボランティアのGcより作製）、または、コントロールのPBSをPBMC培養の培地に添加し4時間培養した。その後、温PBSで細胞を洗浄し、浮遊細胞と培地を除いた。
培養した付着細胞分画の貪食能をPhagocytosis Assay Kit (IgG FITC, Cayman) を用いて、IgGでcoatingされた蛍光ビーズを付着細胞に加え90分間培養した。洗浄後、蛍光顕微鏡によりランダムに10視野を撮影した。蛍光顕微鏡写真をWinROOFを用いて解析し、写真に占める蛍光の面積絶対値を求めマクロファージの貪食能として評価した。
試験結果
control
プレMAF 10 ng/ml
プレMAF 30 ng/ml
プレMAF 100 ng/ml
ヒトPBMC付着細胞分画はプレMAF処理により明らかな貪食能の増加が認められ、10ng/mlのプレMAFで最も強い貪食能の増加が認められた。
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