プレMAFの技術情報
- プレMAFに関する実験
- マウス腹腔マクロファージを用いた貪食活性経時変化評価試験（徳島大学との共同研究結果）
マウス腹腔マクロファージを用いた
貪食活性経時変化評価試験
（徳島大学との共同研究結果）
試験方法
ICRマウス（♀、8 weeks）を頸椎脱臼し、マウス腹腔マクロファージを回収した．回収後、Burker-Turk型血球計算版にて1.0×106 cells/mLに調整した．
24穴プレートに滅菌したカバーガラスを入れ、採取・調整した腹腔内細胞液を5.0×105 cells/well分注の上、カバーガラスにマクロファージを定着（37℃・1 h）させた．定着後、腹腔内細胞液をエッペンチューブに回収し、サンプル（プレMAF）及び比較としてRPMI培地（control）を加え、反応させた（37℃・1 h）．定着させたカバーガラスは、RPMI培地にて洗浄の上、インキュベート（37℃・15 h）を行った．
インキュベート後、腹腔液処理サンプルをそれぞれ添加し、マクロファージを刺激（37℃・3 h）し、0.5%オプソニン化SRBCを加え、貪食させた（37℃・1.5 h）．貪食後、洗浄の上、ギムザ染色し、顕微鏡にて検鏡を行った．
* ：RPMI培地のみ
| 群 | 試験物質 | 試験物質濃度 | Well数 |
|---|---|---|---|
| control | なし* | － | 3 |
| 0ヶ月 | プレMAF | 10 ng/well | 3 |
| 1ヶ月（4℃保管） | プレMAF | 10 ng/well | 3 |
| 2ヶ月（4℃保管） | プレMAF | 10 ng/well | 3 |
| 3ヶ月（4℃保管） | プレMAF | 10 ng/well | 3 |
試験結果
プレMAFは冷蔵保管3ヶ月でもマクロファージを活性化することが示唆された。
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